①在宿主細胞中能保存下來并能大量復制，且對受體細胞無害，不影響受體細胞正常的生命活動。

②有多個限制酶（restriction enzymes）切點，而且每種酶的切點最好只有一個，如大腸桿菌pBR322就有多種限制酶的單一識別位點，可適于多種限制酶切割的DNA插入。

③含有復制起始位點，能夠獨立復制；通過復制進行基因擴增，否則可能會使重組DNA丟失。

④有一定的標記基因，便于進行篩選。如大腸桿菌的pBR322質(zhì)粒攜帶氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因，就可以作為篩選的標記基因。一般來說，天然運載體往往不能滿足上述要求，因此需要根據(jù)不同的目的和需要，對運載體進行人工改建?，F(xiàn)在所使用的質(zhì)粒載體幾乎都是經(jīng)過改建的。

⑤載體DNA分子大小應合適，以便操作。

基因克隆的載體類型：質(zhì)粒載體，噬菌體載體，柯斯質(zhì)粒載體，M13噬菌體載體，噬菌粒載體。

質(zhì)粒載體是一種相對分子質(zhì)量較小、獨立于染色體DNA之外的環(huán)狀DNA(一般有1～200 kb左右，kb為千堿基對)，有的一個細菌中有一個，有的一個細菌中有多個。質(zhì)粒能通過細菌間的接合由一個細菌向另一個細菌轉(zhuǎn)移，可以獨立復制，也可整合到細菌染色體DNA中，隨著染色體DNA的復制而復制。

利用噬菌體作載體，主要是將外來目的DNA替代或插入中段序列，使其隨左右臂一起包裝成噬菌體，去感染大腸桿菌，并隨噬菌體的溶菌繁殖而繁殖。

質(zhì)粒和噬菌體載體只能在細菌中繁殖，不能滿足真核DNA重組需要。感染動物的病毒可改造用作動物細胞的載體。由于動物細胞的培養(yǎng)和操作較復雜、花費也較多，因而病毒載體構建時一般都把細菌質(zhì)粒復制起始序列放置其中。使載體及其攜帶的外來序列能方便地在細菌中繁殖和克隆，然后再引入真核細胞。

現(xiàn)在人們還在不斷尋找新的運載體，如葉綠體或線粒體DNA也有可能成為運載體。

在實際生活中，胰島素就可以通過使用載體將已插入胰島素基因片段的質(zhì)粒放入大腸桿菌內(nèi)。經(jīng)過插入基因片段的質(zhì)粒就稱作載體。該質(zhì)粒在細菌內(nèi)可以進行自我復制，并且不會影響到生物原來的活動。